Q: 我有一个Quant-iT RNA检测试剂盒，而想将它用于Qubit荧光计。可以吗？

可以，使用手册中有关于此应用的说明。

Question 1

I am new to LC-MS and Triple Quadrupole MS instruments and need to know how to shut down my system at the end of the day. Can you please help?

Accepted Answer

The acquisition software allows one to select to automatically have the system go to standby mode which turns the pump(s) off and the ion-source voltage and spray temperature while the ion-transfer tube temperature remains on and a low flow of nitrogen blows across its entrance. This minimizes the chances of letting contaminated ambient air entering the mass spectrometer.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Mass Spectrometry Support Center.

Question 2

为什么我的NanoDrop分光光度计或A260/A280值比Qubit荧光计显示的浓度高？

Accepted Answer

分光光度计不能区分完整核酸、小片段、降解样本，以及单核苷酸。试剂盒中的染料仅检测长度超过20mer左右的完整核酸链。试剂盒仅识别完整DNA或RNA，而忽略降解样本。

Question 3

我的Qubit荧光计遇到了固件相关问题。我应当如何做？

Accepted Answer

请从我们的网站下载并安装最新版本的Qubit固件（https://www.thermofisher.com/us/en/home/industrial/spectroscopy-elemental-isotope-analysis/molecular-spectroscopy/fluorometers/qubit/qubit-technical-resources.html）

对Qubit 1.0, 2.0 和 3.0荧光计，去这个链接下载：https://www.thermofisher.com/us/en/home/industrial/spectroscopy-elemental-isotope-analysis/molecular-spectroscopy/fluorometers/qubit/qubit-technical-resources/previous-qubit-models.html

Question 4

我的Qubit荧光计屏幕冻结，或者仪器不能打开。我应当如何做？

Accepted Answer

对于Qubit 1.0仪器，如果它和电脑相联，那么将它和电脑的连接解除，拔掉电源，等待至少10秒，然后重新插上电源。

对于Qubit 2.0，3.0，4.0 仪器，如果可能，关闭电源或拔掉电源，等待至少10秒，然后重新插上电源。在固件升级过程中，请不要将仪器电源拔掉或将USB闪存拔掉。

Question 5

Qubit荧光计屏幕显示我的样本“超出范围”（数值过低）。我应当如何做？

Accepted Answer

如果可能，你可以试试使用较大体积的样本（最多20µL）。此外，如果你使用的是Qubit DNA BR检测试剂盒或Qubit RNA BR检测试剂盒，可以试试Qubit DNA HS检测试剂盒或Qubit RNA HS检测试剂盒，因为它们的灵敏度更高。

Question 6

Qubit荧光计屏幕显示我的样本“超出范围”（数值过高）。我应当如何做？

Accepted Answer

稀释你的样本，或者使用较小体积的样本，重新检测。此外，如果你使用的是Qubit DNA HS检测试剂盒或Qubit RNA HS检测试剂盒，可以试试Qubit DNA BR检测试剂盒或Qubit RNA BR检测试剂盒，因为它们的灵敏度更低。

Question 7

Qubit荧光计不能给出样本读数。我应当如何做？

Accepted Answer

如果出现这种情况，在“查看标准品”或"查看校准"下查看标准品和样本的原始荧光值。确认样本的荧光值落在标准品的荧光值之间（或稍稍高于最高的标准品）。如果不是，那么样本已经超过了检测的精确范围。Qubit荧光计的屏幕会显示“超出检测范围”。

Question 8

我的Qubit荧光计上显示“标准品错误”信息。我应该如何做？

Accepted Answer

这条信息出现可能有几个原因。请在您的仪器上检查如下事项：

1.在 “查看标准品”或"查看校准"下查看标准品的原始荧光值。Standard 2的荧光值是否至少是Standard 1荧光值的10到50倍。对于蛋白检测，Standard 3的荧光值是否是Standard 2荧光值的大约2倍。
2.检查你的标准品放置顺序是否正确。
3.检查你是在合适的检测管中使用了10µL的标准品和190µL的Qubit染料工作溶液。
4.对于RNA检测，可以试试新开一管Standard 2，以防已经打开的RNA标准品已经降解。
5.检查Qubit检测试剂盒以及标准品的收货日期。试剂盒从收到的日期起可以稳定使用至少6个月。如果该试剂盒已经超过一年并且Qubit荧光计不能读取标准品，那么应当换用一个新的试剂盒。
6.检查仪器是否正常工作。打开盖子。运行任一Assay的新的校准。你可以看到一个红色灯（对于RNA Assay）或一个蓝色灯（对于所有其它Assay）闪烁5次。

Question 9

我有一个Quant-iT RNA检测试剂盒，而想将它用于Qubit荧光计。可以吗？

Accepted Answer

可以，使用手册中有关于此应用的说明。

Question 10

使用Qubit荧光计测定超螺旋质粒DNA和松弛状态的质粒DNA，两者信号会有区别吗？

Accepted Answer

是的。我们观察到20–30%的差别。对于不同形态的质粒DNA，我们建议使用和样本中的质粒DNA形态非常近似的标准品。欲获知创建自定义优化检测法的信息，请访问我们的网站(https://www.thermofisher.com/search/results?query=MyQubit)。

Question 11

Qubit荧光计可以对质粒进行定量吗？

Accepted Answer

是的。对于典型的高浓度的小抽DNA（超过50 ng/μL），可以使用Qubit DNA BR检测法。对于微量质粒或少量质粒，可以使用Qubit DNA HS检测法。但是，关于构象问题请参见下一问题。

Question 12

I would like to use my Qubit 4 Fluorometer with the Qubit 1X dsDNA BR Assay, but the assay is not listed as an option on the fluorometer. How can I resolve this?

Accepted Answer

The Qubit 4 Fluorometer needs to be updated. The Qubit 4 Fluorometer can be updated with the USB that was provided with the Qubit. If you do not have the USB, we recommend using an empty 2.0GB that is FAT32 formatted. If the USB is not recognized, leave USB plugged in for a few minutes before running the update. This should give you the assay you need to run the Qubit Assay.

You can find the updates on the Technical Resources for Qubit Fluorometers page.

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